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            五羥色胺elisa的操作流程及注意事項

            發布時間:2023-03-07      點擊次數:228
              五羥色胺elisa是色氨酸代謝的中間產物,它主要存在于腸嗜鉻細胞、血清素激活的神經元和血小板中,它已被確定為是中樞神經系統的一種神經遞質。循環血液中的五羥色胺幾乎都集中于血小板內。循環五羥色胺濃度的變化可反映出人體的一些病理變化,這些病理變化包括:慢性肌緊張性頭痛、精神分裂癥、高血壓、舞蹈癥和早期急性闌尾炎。血清五羥色胺的檢測對類癌綜合征的檢測具有重要臨床意義。人們預計:在不久的將來,人們對血小板內五羥色胺的研究興趣(包括五羥胺的吸收及釋放動力學研究)應該會不斷增長。
              
              五羥色胺elisa操作流程:
              
              1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
              
              2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
              
              3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
              
              4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
              
              5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
              
              6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
              
              7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
              
              五羥色胺elisa注意事項:
              
              1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。
              
              2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致精確度誤差及OD值錯誤地升高。
              
              3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。
              
              4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。
              
              5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!
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